細胞培養基制備中硫酸銨的加入使用

    硫酸銨中常含有少量的重金屬離子，對細胞培養基有敏感作用，使用前必須用H2S處理：將硫酸銨配成濃溶液，通入H2S飽和，放置過夜，用濾紙除去重金屬離子，濃縮結晶，100℃烘干后使用。另外，高濃度的硫酸銨溶液一般呈酸性（PH=5.0左右），使用前也需要用氨水或硫酸調節至所需PH。

　　硫酸銨的加入有以下幾種方法：1）加入固體鹽法用于要求飽和度較高而不增大溶液體積的情況；2）加入飽和溶液法用于要求飽和度不高而原來溶液體積不大的情況；3）透析平衡法先將鹽析的樣品裝于透析袋中，然后浸入飽和硫酸銨中進行透析，透析袋內硫酸銨飽和度逐漸提高，達到設定濃度后，目的蛋白析出，停止透析。該法優點在于硫酸銨濃度變化有連續性，鹽析效果好，但手續煩瑣，需不斷測量飽和度，故多用于結晶，其它情況少見。

　　使用固體硫酸銨時：1）必須注意飽和度表中規定的溫度，一般有0℃或室溫兩種，加入固體鹽后體積的變化已考慮在表中；2）分段鹽析中，應考慮每次分段后細胞培養基濃度的變化。一種蛋白質如經二次透析，一般來說，*次鹽析分離范圍（飽和度范圍）比較寬，第二次分離范圍較窄。3）鹽析后一般放置半小時至一小時，待沉淀*后才過濾或離心。過濾多用于高濃度硫酸銨溶液，因為此種情況下，硫酸銨密度較大，若用離心法需要較高離心速度和長時間的離心操作，耗時耗能。離心多用于低濃度硫酸銨溶液。