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耐藥株細胞PCR檢測試劑盒試劑準備

點擊次數:552 更新時間:2020-04-09
 
  耐藥株細胞PCR檢測試劑盒試劑準備
 
  1. DNA模板
 
  2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
 
  3.10×PCR Buffer
 
  4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
 
  5.Taq酶
 
  注意事項
 
  1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個的PCR實驗室。
 
  2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
 
  3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
 
  4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
 
  5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
 
  6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
 
  7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
 
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