一、問：用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移，有時發生快速變化，原因何在？如何解決？

　　答：關于漂移問題：

　　1.溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定

　　2.流動相發生變化，解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等

　　3.柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡

　　關于快速變化問題

　　1.流速發生變化，解決辦法是重新設定流速，使之保持穩定

　　2.泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。

　　3.流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合

　　二、問：液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么？

　　答：1.篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。

　　2.存在干擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子

　　三、問：HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法

　　答：1.樣品量不足，解決辦法為增加樣品量 醫.學教育網搜集整理

　　2.樣品未從柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子

　　3.樣品與檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器

　　4.檢測器衰減太多。調整衰減即可。

　　5.檢測器時間常數太大。解決辦法為降低時間參數

　　6.檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。

　　7.檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。

　　8.記錄儀測壓范圍不當。調整電壓范圍即可。

　　9.流動相流量不合適。調整流速即可。

　　10.檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器，重作校正曲線。

　　四、問：做HPLC分析時，柱壓不穩定，原因何在？如何解決？

　　答：原因可能有：

　　1.泵內有空氣，解決的辦法是清除泵內空氣，對溶劑進行脫氣處理；

　　2.比例閥失效，更換比例閥即可；

　　3.泵密封墊損壞，更換密封墊即可；

　　4.溶劑中的氣泡，解決的辦法是對溶劑脫氣，必要時改變脫氣方法；

　　5.系統檢漏，找出漏點，密封即可；

　　6.梯度洗脫，這時壓力波動是正常的。